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prevalencia de zoonosis tripanosoma relativamente alta en Olola orientogalpa y características filogenéticas de nematodos aislados con infección experimental en modelo animal | Enfermedades infecciosas de la pobreza

Información general sobre la vista previa y los datos de la encuesta

muestras de caracol O. olula Se recolectaron de 54 sitios (que se muestran en la Figura 1 y el Archivo complementario 1: Figura S1), con 38–214 caracoles de cada sitio. Se encontraron trematodos en 17 sitios examinados después de la autopsia, incluidos el embalse de Tianbao y Heidi Village en Nanning; la ciudad de Liushan, la aldea de Liutang, la aldea de Guangrong y la aldea de Cha en la ciudad de Liuzhou; y Maling Town en la ciudad de Guilin. Durante la autopsia se encontraron diferentes estadios de desarrollo del foramen (redias, cercarias y metacercarias).

gráfico 1

Información detallada relacionada con los sitios de muestreo, selección de muestras y método de recopilación de información. aY el B Entorno ecológico típico O. olula (Áreas tipo 1: áreas de cultivo de arroz); C O. olula Foto en vista frontal. DrY el mi Entorno ecológico típico O. olula (Tipo Zonas 2: Áreas de vegetación de cultivos agrícolas que a menudo se utilizan como alimento crudo); F O. olula Vista trasera de la foto

Identificación de especies O. olula

Características morfológicas de O. olula Identificado por las características cuantitativas tradicionales de la concha (corteza: mediana a grande, delgada, de color marrón o amarillento; altura de la concha: 10 mm; ancho de la concha: 8 mm; cuatro a cinco bandas helicoidales marrones separadas; abertura ovalada, agujero umbilical en forma de hendidura) . O. olula Las recolectadas en este estudio son pequeñas, ovaladas y tienen un caparazón delgado y una pequeña abertura (Fig. 1C,F). Los datos de ITS1 para todos los caracoles secuenciados coincidieron al 100 % con los de las secuencias notificadas anteriormente en GenBank con el número de entrada HM769888–HM769898.

Descripciones de las características morfológicas e identificación molecular de larvas de trematodos

En general, los caracteres morfológicos de tres equinodermos (Equinostoma s. , H. conoideumY el E. revolución) mostró gran similitud morfológica (Fig. 2). Las redias eran cilíndricas, afiladas en ambos extremos, ligeramente puntiagudas en la cabeza y más puntiagudas en la cola. El cuerpo estaba doblado hacia la superficie ventral con pies musculosos, el movimiento era lento. La cola de las cercarias no estaba bifurcada (Fig. 2B-H). Detrás de las similitudes generales, jefe H. conoideum cercariae mostró espinas prominentes, así como ventosas ventrales, faringe e intestinos bien desarrollados (Fig. 2D-F). Las metacercarias eran redondas y tenían dos paredes transparentes, siendo la pared exterior más gruesa que la interior. Dentro de la bolsa se pueden ver piruletas y brotes de las larvas. Debido al movimiento de las larvas dentro de la bolsa, no era fácil notar las pequeñas espinas alrededor de su cabeza. depósito de Australápatimón s. Un bulto claro en la cabeza. Las larvas de Cercaria tenían una cola bifurcada que era más larga que la longitud del cuerpo. cercariasis P. cordatum También tenía una cola bifurcada visible y una ventosa orofaríngea (Fig. 2J-L).

foto 2
Figura 2

La morfología de redias, cercarias y metacercarias se recolectó en O. olula. aC Redias, cercarias y metacercarias para Equinostoma s ; DrF Redias, cercarias y metacercarias para Hipoderaeum conoideum; jyo Redias, cercarias y metacercarias para Echinostoma revoluteum; yY el k Redias y cercarias de Australápatimón s ; los Cercarias cordón faríngeo

Las especies de trematodos aisladas fueron identificadas por amplificación de la región ITS2 y verificadas por BLAST. El análisis BLAST de secuencias de larvas de trematodos secuenciados mostró los niveles más altos de identidad de secuencia (99 % a 100 % de identidad de secuencia) para las secuencias indicadas en GenBank. Identificamos cinco tipos diferentes de trematodos, que incluyen Australápatimón s. , Equinostoma s. , E. revoluciónY el H. conoideumY el P. cordatum. Las longitudes de ITS2 fueron 292 pb, 429 pb, 430 pb, 432 pb y 294 pb, respectivamente. Las secuencias de nucleótidos obtenidas en este estudio se han depositado en la base de datos GenBank con los números de acceso KM980466-KM980471 (Australápatimón sp.), KJ848453 – KJ848455 (Equinostoma sp.), KM980474 y KM980476 – KM980477)E. revolución), KJ944311 – KJ944313 (H. conoideum) y OL870492 )P. cordatum).

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La propagación de nematodos en O. olula

La incidencia global de senos perforados fue del 22,1% (1818/8238). E. revolución Se detectó en caracoles de 11 sitios de muestreo, con una tasa de infección de 13,0% (1069/8238). Hipoderaum conoideum La infección por caracoles se detectó en dos sitios de muestreo, con una tasa de infección promedio de 3,8% (315/8238). Australápatimón s. Se detectó en caracoles de dos sitios de muestreo, con una tasa de infección del 2,5% (206/8238). infección P. cordatum Y el Equinostoma s. Se detectó en el sitio de muestreo con tasas de infección de 0,4% (34/8238) y 2,4% (194/8238), respectivamente. La prevalencia general y la proporción de los dos componentes de la enfermedad perforada variaron en el tipo 1 y el tipo 2 (s <0,01).

análisis filogenético

En total, se obtuvieron 15 datos de secuencias ITS2 representativos de alta calidad. La Figura 3 muestra un árbol NJ basado en las secuencias presentadas y las secuencias GenBank relacionadas. secuencia ITS2 de Equinostomas. Un clado monomórfico (Fig. 3a) forma una región sombreada rosa, distinta del clado compuesto por E. robustumY el E. FriediY el yo miyagawai . secuencia E. revolución Y el H. conoideum formó un grupo monofilético con E. revolución (AY168930) y H. conoideum (AJ564385) Referencias (Fig. 3a área sombreada en azul). secuencia ITS2 de Australápatimón s. formó un grupo con una. Puerto (KU950451) valorado en 99 % de arranque pero formó un clado único con un valor de 75 % de arranque. La Figura 3b muestra que la secuencia ITS2 de P. cordatum Era idéntica a la secuencia de referencia de P. cordatum (KJ137231).

higos. 3
figura 3

Análisis genéticos de gusanos trematodos aislados basados ​​en secuencias ITS2 y secuencias GenBank relacionadas. a Neighbor se une al árbol de consenso bootstrap con 1000 iteraciones de bootstrap para rediae de equinostomas; B Vecino se une al árbol de consenso de arranque con 1000 iteraciones de arranque de Australápatimón s. Y el cordón faríngeo

Experiencia en infecciones de laboratorio con Equinostomas. , E. revolución Y el H. conoideum

Realizamos un experimento de infección con tres especies de trematodos para evaluar las tasas de prevalencia de parásitos en patitos. Los patitos fueron expuestos individualmente a Equinostoma s. (norte = 52), E. revolución (norte= 53) y H. conoideum larvas (norte = 57), y todos ellos fueron infectados con éxito. Durante la observación posterior de patitos (17 dpi) alimentados con Equinostoma s. Herido O. olula Descubrimos los huevos [(195.8 ± 3.1) × (143.8 ± 1.6) μm] En heces, características morfológicas de los adultos Equinostoma s. Presentado como medidas: largo del cuerpo (9,8 ± 1,8 mm), ancho (1,2 ± 2,3 mm), boca de chupete [(638.9 ± 1.9) × (399.2 ± 15.8) μm]Correcto [(1591.2 ± 17.8) × (1338.2 ± 19.6) μm]faringe [(492.6 ± 54.3) × (331.7 ± 74.8) μm]testículo anterior, [(1120.5 ± 139.6) × (707.4 ± 49.2) μm]testículo posterior [(1274.9 ± 181.1) × (880.4 ± 49.2) μm]y ovario [(818.9 ± 10.2) × (527.9 ± 48.3) μm].

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Por otro lado, encontramos H. conoideum Los huevos se alimentan en patitos infectados. O. olulaDesde tres ubicaciones después de una duración promedio de 12 ppp (rango: 9 ppp a 14 ppp). Características morfológicas adultas H. conoideum Eran los siguientes: largo del cuerpo (1,05 ± 0,61 mm), ancho (1,5 ± 0,27 mm), chupete oral [(424.2 ± 16.1) × (293 ± 11.2) μm]Correcto [(1610.2 ± 98.4) × (1594.6 ± 198.7) μm]faringe [(379.8 ± 53.2) × (253.6 ± 44.9) μm]testículo anterior, [(1902.6 ± 164.6) × (875.3 ± 140.8) μm]testículo posterior [(2045.2 ± 255.8) × (898.2 ± 139.2) μm]ovario [(751.7 ± 129.3) × (553.9 ± 110.6) μm]Y poseer 50 tenedores. E. revolución huevos [(104.1 ± 15.1) × (63.1 ± 12.6 μm] Se encuentran a 10 dpi. morfología adulta E. revoluciónCaracterizado por: longitud del cuerpo (8,5 ± 1,2 mm), ancho (2,2 ± 0,7 mm), succión bucal [(260.0 ± 32.5) × (180.1 ± 19.8) μm]Correcto [(741.6 ± 23.7) × (598.3 ± 25.1) μm]faringe [(193.1 ± 30.5) × (150.6 ± 27.8) μm]testículo anterior, [(628.0 ± 31.2) × (459.4 ± 27.8) μm]testículo posterior (725,5 ± 17,1 × 557,9 ± 18,7 μm), ovario [(411.8 ± 18.5) × (311.2 ± 15.4) μm]y la presencia de un cabecero de 37 columnas.

características de desarrollo de E. revolución desde juveniles hasta adultos, en azafatas de pato

Los experimentos están diseñados solo para estudiar la evolución. E. revolución En familias de patos, porque no había suficientes caracoles infectados con Metacercaria Equinostoma s. Y el H. conoideum . características de desarrollo de E. revolución Se registraron diseccionando patitos infectados entre 1 y 10 ppp cuando se detectaron los huevos por primera vez en las heces. E. revoluciónPuede obtenerse en el intestino delgado de 1 a 7 dpi y luego migrar y residir en el ciego y el colon de 8 a 10 dpi. La longitud del cuerpo evolucionó de 490 µm a 8500,5 µm (aumento de 17 veces). A 1 ppp, los juveniles tenían un collar circunferencial con 37 columnas en un círculo doble y caracterizado por ventosas labiales, acetábulo, faringe, esófago y ciego claramente visibles. A 1 dpi apareció la pequeña estructura del testículo. A los 4 ppp, los ovarios habían comenzado a organizarse y desarrollarse, y había comenzado a formarse un vaso seminal. El útero tubular apareció a los 4 ppp, y la maduración de los órganos reproductivos y el sistema digestivo se produjo entre los 6 y los 8 ppp. Las glándulas de la yema se vieron por última vez y se observaron varios ovocitos depositados en el útero a los 9 ppp. E. revoluciónLas larvas maduraron a 10 dpi y excretaron huevos (Fig. 4). El desarrollo diario de E. revoluciónEl desarrollo se registró en detalle y los resultados se muestran en el Archivo complementario 3: Tabla S2.

Figura 4
Figura 4

evolución E. revoluciónEn el host de pato de 1 a 10 dpi

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